Universitätsklinikum Münster

Ziel dieser Arbeit ist es jetzt, den genauen Pathomechanismus zu untersuchen, wie ein Verlust dieser stark konservierten Proteine zu Nierenzysten führt. Hierzu untersuchen wir sowohl wildtypische (gesunde) Epithelzellen als auch Tumorzellen, welche teilweise mittels CRISPR/Cas9 genmanipuliert werden (u.a. ein totaler Knockout der PATJ-Expression), in der 2D- und 3D-Säugetierzellkultur sowie intestinale und Nieren-Organoide mit einem konditionellen Knockout von Pals1/PATJ. Das Projekt beinhaltet eine Vielfalt von molekularbiologischen (z.B. RT-PCR, Klonierungen, Mutagenese-PCR), biochemischen (Co-Immunpräzipitation, Western Blot, Protein-Pulldowns etc.) und zellbiologischen (2D/3D/Organoid-Zellkultur, CRISPR/Cas9 gene editing, Immunostainings, (Super-Resolution-) konfokale Lasermikroskopie, FLIM/FRET-Experimente, Live-Imaging, FACS-Analysen) Techniken. Dieses Projekt wird in Assoziation mit dem SFB 1348 (Dynamic Cellular Interfaces) durchgeführt und Sie werden an dem Seminarprogramm des SFB 1438 und der Graduiertenschule teilnehmen können.